بهینه سازی روش تشخیصی pcr-elisaبرای شناسایی عفونت های سایتومگالوویروس انسانی

نویسندگان

مجید تلخابی فرد

m talkhabifard, m golestan university of medical sciences, gorgan, iranگروه میکروبیولوژی ناعمه جاوید

n javid, n golestan university of medical sciences, gorgan, iranگروه میکروبیولوژی عبدالوهاب مرادی

a moradi, a , golestan university of medical science, gorgan, iranگروه میکروبیولوژی امیر قائمی

a ghaemi, a golestan university of medical sciences, gorgan, iranگروه میکروبیولوژی علیجان تبرائی

چکیده

چکیده زمینه و هدف: سایتومگالوویروس انسانی یک عامل شناخته شده مهم در ایجاد عفونت های مادرزادی می باشد که می تواند باعث ایجاد بیماری و عوارض جدی در نوزادان شود. بکارگیری روش های تشخیص سریع، حساس و اختصاصی این عفونت ویروسی در نمونه های بالینی نوزادان یک ضرورت می باشد. در این مطالعه روش تشخیصی بر پایه pcr و elisa، برای شناسایی ژنوم سایتومگالوویروس انسانی در نمونه های ادرار نوزادان بهینه سازی گردید. روش بررسی: برای راه اندازی سیستمpcr–elisa، توالی آغازگرها و کاوشگر اختصاصی از ناحیه ژنی کد کننده گلیکوپروتئین b سایتومگالوویروس انسانی انتخاب شدند. ابتدا نمونه های مورد آزمایش (dna استخراج شده از نمونه های ادرار و شاهد ها) طی مرحله تکثیر، توسط دیگوگزیژنین نشاندار شده، سپس این محصولات توسط کاوشگر بیوتینه شناسایی و ایجاد هیبرید می کنند. این مکمل توسط استرپتاویدین متصل شده به چاهک های الایزا، بی حرکت شده، در مرحله بعد توسط آنتی بادی ضد دیگوگزیژنین متصل به آنزیم پراکسیداز، ردیابی و رنگ ایجاد شده توسط سوبسترا مورد سنجش قرار گرفت. یافته ها: سویه های بالینی جدا شده از نمونه های ادرار 16 بیمار، توسط این روش شناسایی شدند.pcr-elisa راه اندازی شده قادر است با حساسیت کمتر از حدود 100 کپی از ژنوم سایتومگالوویروس، عفونت را در نمونه های بالینی تشخیص دهد. در این روش واکنش غیر اختصاصی تأثیر گذار دیده نشد. نتیجه گیری: pcr-elisa می تواند به عنوان روشی حساس، اختصاصی و قابل اعتماد برای شناسایی نیمه کمی عفونت سایتومگالوویروس در نمونه های بالینی مطرح باشد. واژه های کلیدی: سایتومگالوویروس انسانی، گلیکوپروتئین b، pcr-elisa، نیمه کمی

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

شناسایی عفونت سایتومگالوویروس انسانی در تومورهای مغزی گلیوما

هدف: ویروس سایتومگال انسانی بتا هرپس ویروسی است که باعث عفونت پایدار در افراد شده و بیماری‏‏های شدیدی را در جنین و افراد مبتلا به نقص سیستم ایمنی ایجاد می‏کند. اگر چه ویروس سایتومگال انسانی به عنوان یک ویروس عامل در سرطان‏های انسانی به حساب نمی‏آید اما مطالعات جدید نشان می‏دهد عفونت با ویروس سایتومگال انسانی ممکن است به‏طور اختصاصی باعث بعضی از سرطان‏های انسانی از جمله گلیوما باشد. گلیوما یکی ا...

متن کامل

مقایسه ارزش تشخیصی دو روش سرولوژی الایزا و رایت در بیماری بروسلوز انسانی با PCR مثبت

Background and purpose: Brucellosis is a zoonotic disease with worldwide distribution. Humans are usually infected through contact with infected animals or unpasteurized dairy products. We observed contradictory diagnostic value of ELISA and Standard tubal agglutination test (wright) in other studies. Therefore, we designed this study to compare the diagnostic value of ELISA and Standard tubal ...

متن کامل

شناسایی ژن پیووردین Pyoverdine در جدایه های دامی و انسانی سودوموناس آئروژینوزا با روش Multiplex-PCR

Background and Aim: Pseudomonas aeruginosa is one of the most important factors in hospital infections, especially in patients with immune deficiency and Childhood diseases. The Virulence of bacteria are due to the presence of the Pyoverdine gene, which has many effects on the wild type of bacteria during the pathogenic pathway. Identification of different classes of PVD gene is necessary for t...

متن کامل

جدا سازی سویه های سودوموناس آئروژینوزا تولید کننده متالوبتالاکتاماز از بیماران مبتلا به عفونت های سوختگی و شناسایی ژن های bla vim وbbla imp با روش PCR

زمینه و اهداف: سودوموناس آئروژینوزا یکی از عوامل مهم عفونت های بیمارستانی خصوصا در بیماران مبتلا به نقص سیستم ایمنی می باشد. برای درمان عفونت های شدید ناشی از این میکروارگانیسم آنتی بیوتیکهای متعددی از جمله بتالاکتامها به کار می روند. شیوع بیمارستانی سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک های بتالاکتام بسیار گزارش شده است که از مهمترین عوامل دخیل در این مقاومت ها، تولید آنزیم های بتالاکتاماز...

متن کامل

بهینه سازی اندازه و شکل سازه های خرپا با روش بهینه سازی الگوریتم مثلث بهینه گر

در این مقاله روش بهینه سازی فراابتکاری جدید تحت عنوان الگوریتم مثلث بهینه گر برای پایین آوردن وزن سازه های خرپا ارائه شده است. این روش از مثلث الهام گرفته است. در این روش بردار اولیه متغیرهای طراحی بعنوان قاعده مثلث (سطر اول) در نظر گرفته می شوند. سپس توابع هدف محاسبه و بهترین و بدترین پاسخ مشخص می شوند. بدترین پاسخ از جمعیت حذف می گردد و بقیه جمعیت با بازیابی سطر دوم را تشکیل می دهند. این عمل ...

متن کامل

تشخیص سریع و بررسی میزان شیوع سیتومگالوویروس در نوزادان زیر 3 هفته با روش PCR وReal Time PCR

مقدمه: بیشتر بیماری های نوزادان از طریق مادر به آن ها انتقال می یابد و احتمال ابتلای نوزادان به برخی بیماری ها با آلودگی مادر ارتباط زیادی دارد. سایتومگالوویروس شایع ترین علت عفونت مادرزادی محسوب شده و به عنوان یکی از عوامل سقط مکرر در مادران به خوبی شناخته شده است، در حال حاضر، روش های مولکولی می تواند به صورت معمول در امر تشخیص بسیار موثر باشد و در این مطالعه هدف راه اندازی متد تشخیصی با استف...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
medical laboratory journal

جلد ۸، شماره ۵، صفحات ۱۴-۲۱

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023